Diseño, síntesis y caracterización de novel eco.

Scientific Reports volumen 12, Número de artículo: 10491 (2022) Citar este artículo

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Este trabajo informa sobre un enfoque fácil y ecológico para preparar nanopartículas de AgIO3 decoradas con quitosano (quitosano-AgIO3). El bionanocompuesto se caracterizó completamente mediante imágenes de microscopía electrónica de barrido (SEM), espectroscopía de rayos X de dispersión de energía (EDX) y análisis de difracción de rayos X (XRD). Se investigó el efecto antibacteriano del bionanocompuesto de quitosano-AgIO3 para Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus saprophyticus, Escherichia coli y Staphylococcus aureus como microorganismos patógenos mediante el método de recuento en placa, el método de difusión en disco y las mediciones de densidad óptica (DO). El desempeño antibacteriano del bionanocompuesto se comparó con dos fármacos comerciales (penicilina y sulfadiazina de plata) y en algunos casos, el bionanocompuesto sintetizado tiene un mejor efecto en la erradicación de bacterias. El bionanocompuesto representó grandes propiedades antibacterianas. Se realizó citometría de flujo para investigar el mecanismo del bionanocompuesto como agente antibacteriano. La producción de especies reactivas de oxígeno (ROS) fue responsable de los mecanismos bactericidas. Estos resultados demuestran que el bionanocompuesto quitosano-AgIO3, como un tipo de material antibacteriano, tiene potencial para su aplicación en una amplia gama de aplicaciones biomédicas y de purificación de agua. El diseño y la síntesis de materiales antibacterianos ecológicos y biodegradables con procesos simples y utilizando materiales fácilmente disponibles hacen que el producto final sea económicamente asequible y pueda escalarse en diferentes industrias.

En cuanto a la propagación de enfermedades infecciosas atribuibles a bacterias patógenas y el aumento de la resistencia a los antibióticos, aumenta la demanda por el diseño y la síntesis de agentes antibacterianos únicos1. Pseudomonas aeruginosa es un patógeno pernicioso como un bacilo aerobio gramnegativo aislado del suelo, el agua, las plantas y los animales, incluidos los humanos. También se sabe que Pseudomonas aeruginosa cambia su fenotipo y se adapta al medio ambiente y es una especie bacteriana multirresistente que afecta a pacientes con un sistema inmunitario comprometido2,3. Klebsiella pneumoniae es un patógeno gramnegativo en forma de bastoncillo que se encuentra ampliamente en la boca, la piel, los intestinos, los entornos hospitalarios y los dispositivos médicos. El patógeno oportunista Klebsiella pneumoniae afecta principalmente a las personas con sistemas inmunitarios comprometidos o está debilitado por otras infecciones. Teniendo en cuenta que Klebsiella pneumoniae se ha vuelto cada vez más resistente a los antibióticos, la erradicación exitosa de esta bacteria es muy importante4,5. Staphylococcus saprophyticus está relacionado con infecciones del tracto urinario no complicadas en humanos6. Escherichia coli (gram-negativa) y Staphylococcus aureus (gram-positiva) causan enfermedades diarreicas en humanos después de contaminar el agua. Un suministro de agua potable segura es un aspecto crítico y esencial de la salud humana7. La sulfadiazina de plata (AgSD) se ha utilizado para el tratamiento de quemaduras de segundo orden desde principios de la década de 1970. Representa un apósito antibacteriano más eficaz con una mejor estimulación de la regeneración de heridas8,9. La penicilina es un antibiótico β-lactámico que es útil contra una amplia variedad de bacterias. Las penicilinas son el fármaco de elección para las infecciones de las vías respiratorias superiores e inferiores (Streptococcus pyogenes), la enfermedad meningocócica (Neisseria meningitides), la sífilis (Treponema pallidum) y las infecciones por anaerobios10. El campo de la nanotecnología se ha presentado como una posibilidad de gran potencial para producir nuevos materiales a nanoescala que representen una gran área de superficie a volumen y propiedades físicas y químicas particulares con amplias aplicaciones11. Entre ellos, se diseñó y sintetizó un biosensor electroquímico de nanoestructura de ADN para monitorear el herbicida cianazina en muestras de agua y alimentos12. Los puntos de carbono co-dopados con nitrógeno y azufre se sintetizaron eficazmente a partir de cáscaras de naranja de desecho a través de un proceso de síntesis fácil y económico como un nano-refuerzo con alta actividad de reacción de reducción de oxígeno13. Además de otras reacciones de reducción de oxígeno, se diseñó y sintetizó un electrocatalizador en medios neutros como una alternativa eficaz a los costosos nanocatalizadores basados en metales14. Se utilizó un nuevo electrodo de pasta de carbono modificado con nanocompuesto ZIF-8/g-C3N4/Co y bromuro de 1-metil-3-butilimidazolio como líquido iónico como sensor electroquímico extremadamente sensible para la detección de colorantes azo sintéticos15. Se diseñó y fabricó de manera sencilla un biosensor de ADN a base de guanina para monitorear fármacos contra el cáncer durante tratamientos de quimioterapia16. Nanopartículas como agente antibacteriano con una gran relación de área de superficie a volumen que puede proporcionar un mejor contacto con las células bacterianas. Teniendo en cuenta que las nanopartículas tienden a agregarse, lo que podría reducir la propiedad antibacteriana, utilizar un soporte para nanopartículas será muy práctico y útil para producir un nanocompuesto con una alta eficacia antibacteriana17,18. La nanotecnología verde brinda muchas ventajas en términos de desarrollo de procesos, fabricación y diseño de productos. La síntesis de nanocompuestos en la dirección de la química verde tiene muchas preponderancias, incluidas las condiciones de reacción simples y suaves que hacen que el proceso se amplíe, sea económicamente asequible y respetuoso con el medio ambiente19. Los bionanocompuestos podrían usarse en varios campos, como agentes antibacterianos20, bionanocatalizadores21, actividad fotocatalítica22, adsorbentes para metales pesados23 y administración de fármacos24. Con miras a la química verde, extender y utilizar polímeros biodegradables se considera el método más completo para diseñar bionanocompuestos como agente antibacteriano. Los polímeros derivados de recursos naturales, incluidos el almidón, la celulosa, la quitina, el quitosano y la lignina, han surgido como candidatos prometedores para sintetizar bionanocompuestos con aplicaciones particulares25,26,27,28. Como polímero natural derivado del medio marino, el quitosano es un amino polisacárido obtenido por la desacetilación de la quitina (poli-N-acetil-D-glucosamina). La quitina es el segundo polímero natural más abundante después de la celulosa. El quitosano es el derivado más beneficioso de la quitina con numerosos grupos amina e hidroxilo en su estructura, lo que permite la síntesis de biocompuestos con diversas aplicaciones. El quitosano representó características especiales, incluyendo biodegradabilidad, biocompatibilidad, no toxicidad, bajo costo y disponibilidad29,30. Entre los diferentes nanomateriales antibacterianos, las nanopartículas de plata y sus compuestos tienen importantes capacidades antimicrobianas. Las nanopartículas de plata (AgNP) atrajeron la atención de muchos investigadores debido a su actividad antimicrobiana contra una amplia variedad de microorganismos resistentes a los medicamentos31. Las nanoestructuras de oro/plata-telurio (Au/Ag − Te NSs) tienen muy buena actividad antimicrobiana contra diferentes microorganismos debido a las ROS generadas que destruyen la membrana bacteriana32. El óxido de grafeno anclado en nanopartículas de plata (GO-Ag) ha mostrado una buena actividad antibacteriana33, la vancomicina cubierta con nanopartículas de plata como agente antibacteriano34, los nanocables de bionanocompuesto de plata y polianilina como agente antibacteriano35, el bionanocompuesto de celulosa/γ-Fe2O3/Ag como agente antibacteriano36, son algunos de los ejemplos de nanocompuestos de plata con actividad antibacteriana. AgIO3 es un cristal blanco insoluble con una estructura ortorrómbica que representa una buena actividad fotocatalítica para la descomposición de contaminantes orgánicos en la región UV debido a su ancho de banda prohibida y alta tasa de separación de portadores de carga fotoexcitados37,38,39. Las nanopartículas de yodato de plata son muy insolubles (AgIO3 Ksp = 3,1 × 10–8) y podrían utilizarse en el tratamiento del agua, así como en aplicaciones médicas40. En relación con nuestra investigación previa sobre la actividad antibacteriana del nanocompuesto41,42,43, en este estudio presentamos la preparación e identificación del bionanocompuesto de quitosano-AgIO3 como agente antibacteriano (Fig. 1). Hasta donde sabemos, este es el primer informe sobre las propiedades antibacterianas del bionanocompuesto basado en quitosano y yodato de plata contra varias bacterias gramnegativas y grampositivas. El bionanocompuesto Chitosan-AgIO3 se presentó como un producto único, rentable y con alta actividad antibacteriana. Este artículo abre un nuevo enfoque en un campo antibacteriano que involucra compuestos a nanoescala económica y ambientalmente eficientes basados en polímeros naturales. Además, el bionanocompuesto sintetizado podría emplearse en usos amplios y podría ampliarse debido a sus propiedades novedosas y especiales. La fabricación de nanomateriales con recursos disponibles y verdes genera biodegradabilidad y biocompatibilidad y reduce el costo de los productos sintetizados. Los equipos y procedimientos simples y los materiales económicos y fácilmente disponibles sin el uso de tensioactivos, plantillas externas y solventes tóxicos para sintetizar el bionanocompuesto son de gran importancia. Con el fin de reconocer y enfatizar la actividad antibacteriana del bionanocompuesto de quitosano-AgIO3, se comparó el desempeño antibacteriano del bionanocompuesto con dos antibióticos comerciales contra cinco bacterias patógenas humanas. El bionanocompuesto de quitosano-AgIO3 tiene una actividad antibacteriana deseable en comparación con la penicilina contra cinco bacterias diferentes y, en el caso de Pseudomonas aeruginosa y E.coli, incluso tiene un mejor rendimiento. El bionanocompuesto de yodato de plata y quitosano se verificó con sulfadiazina de plata contra cinco bacterias y se determinó que el bionanocompuesto tiene un mejor efecto contra Pseudomonas aeruginosa y también tiene igual eficacia en Klebsiella pneumoniae.

El proceso de síntesis del bionanocompuesto quitosano-AgIO3.

Los solventes, productos químicos y reactivos se adquirieron de varias empresas comerciales, como Merck, Sigma-Aldrich y Fluka, y se usaron tal como se recibieron. La penicilina G 800 000 U fue suministrada por Jaber Ebne Hayyan Pharmaceutical Company (Irán). Los espectros FT-IR se registraron usando un espectrómetro Shimadzu IR-470 en el modo de transmisión usando gránulos de KBr de la muestra. El análisis elemental de las muestras preparadas se realizó mediante análisis EDX registrado en Numerix DXP-X10P. La morfología y estructura del bionanocompuesto fueron estudiadas por SEM, instrumento VEGA2 TESCAN. Los patrones XRD de los polvos sólidos se desarrollaron utilizando un JEOL JDX-8030 (30 kV, 20 mA). Las propiedades ópticas de las muestras se midieron con un espectrofotómetro Shimadzu UV-visible Mini 1240. Se usó un autoclave (Reyhan Teb, 2KW-220v) para esterilizar la cristalería. Se utilizó una incubadora (Sh, Noor Sanat Ferdos) para el cultivo celular. Los datos de citometría de flujo se adquirieron utilizando un BD FACSCalibur (BD Biosciences, San Jose, CA, EE. UU.). Se utilizó diacetato de 2′-7′-diclorodihidrofluoresceína (DCFH-DA) como sonda de detección para evaluar la generación de ROS para el estudio del mecanismo antibacteriano del bionanocompuesto.

Para la síntesis del bionanocompuesto quitosano-AgIO3, se disolvieron 0,16 g de AgNO3 en 10 ml de agua desionizada, luego se agregaron a los 10 ml de solución de quitosano al 0,5 % (m/v) y se agitó durante 30 min en condiciones de oscuridad para adsorber los iones Ag+. . En los 0,21 g siguientes, se disolvió KIO3 en 10 ml de agua desionizada, se añadió gradualmente a la solución anterior y se agitó durante 3 h. Se obtuvo un sólido blanco lechoso, se lavó con agua desionizada y etanol y se secó a 70 °C durante 12 h.

Para el estudio, se realizó el rendimiento antimicrobiano del bionanocompuesto sintetizado, la prueba de difusión en agar estándar, el método de recuento de colonias y la detección de actividad antibacteriana (estudio OD) contra varias bacterias, incluidas Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853), Klebsiella pneumoniae (ATCC 700603) , Staphylococcus saprophyticus (ATCC 1440), Escherichia coli (ATCC 9637), Staphylococcus aureus (ATCC 12600). Además, el rendimiento antibacteriano del yodato de plata de quitosano se comparó con la penicilina y la sulfadiazina de plata utilizando una prueba estándar de difusión en agar. Todos los instrumentos han sido esterilizados a 121 °C durante 10 min en autoclave antes de cualquier proceso. Además, se aplicó el estándar de turbidez de 0,5 McFarland al medio Nutrient Broth para las pruebas antibacterianas.

Se utilizó agar Muller-Hinton como medio base y medio sólido de crecimiento más microorganismos nutritivos; Se añadieron 20 ml de agar Muller-Hinton a la placa (8 cm) y 50 ml a la otra placa (15 cm) en condiciones estériles. Cinco tubos de prueba diferentes que se llenaron con 10 ml de suero fisiológico estéril y cada uno de los cinco microorganismos se ajustó con una turbidez de 0,5 McFarland, luego, utilizando un palo de hockey de vidrio estéril, el cultivo (la concentración celular se ajustó a 107 células/mL) fue dispersa alrededor de la superficie de la placa. A continuación, se añadieron 0,01 g de quitosano-AgIO3 al medio de cultivo de agar Muller-Hinton que contenía bacterias. Las placas de Petri que contenían bacterias y bionanocompuestos se incubaron durante 24 h a 37 °C. Para evaluar los efectos antibacterianos del bionanocompuesto contra estos cinco tipos de bacterias, y compararlo con fármacos comerciales, se estudiaron placas compuestas por penicilina y sulfadiazina de plata (con diferentes concentraciones) en la placa separada que se preparó como se mencionó anteriormente. Se midieron las zonas de inhibición del crecimiento del bionanocompuesto quitosano-AgIO3 frente a Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus saprophyticus, Escherichia coli y Staphylococcus aureus.

Uno de los métodos más prácticos y útiles para estudiar el efecto de los bionanocompuestos como agente antibacteriano frente a bacterias es el método de recuento de colonias. Escherichia coli y Staphylococcus aureus se cultivaron durante 24 h en agar Muller-Hinton y se utilizaron para el método de recuento de colonias. Luego, se ajustaron dos tubos de ensayo que contenían estas bacterias y 10 ml de suero fisiológico estéril con el estándar de turbidez de 0,5 McFarland. Cada una de estas pruebas en tubo se diluyó tres veces con suero fisiológico estéril. A continuación, se añadieron 0,1 ml de DMSO a cuatro matraces de medio de cultivo Nutrient Broth. La solución de opacidad obtenida se dividió luego en dos porciones para cada bacteria y se colocó en dos matraces diferentes. Se añadió bionanocompuesto (0,01 g) a una de las soluciones de cada bacteria en un matraz, y el matraz restante no tenía bionanocompuesto. Por lo tanto, dos matraces tienen bacterias y bionanocompuestos y dos de ellos no tienen bionanocompuestos, los matraces solo tienen bacterias introducidas como prueba para comparar con matraces con bacterias y bionanocompuestos. Estos cuatro matraces se incubaron a 37 °C durante 2 h. A continuación, se añadió 0,1 mℓ del contenido de cada matraz en agar Mueller Hinton y las placas se mantuvieron a 37 °C durante 24 h. El desempeño antibacteriano del bionanocompuesto se investigó contando las colonias en placas de agar después de 24 h.

En primer lugar, se prepararon cuatro matraces con 10 ml de caldo nutritivo. En las siguientes dos pruebas de tubo con Escherichia coli, se ajustó Staphylococcus aureus más 10 ml de suero fisiológico estéril con un patrón de turbidez de 0,5 McFarland. Luego se añadió a los cuatro matraces aproximadamente 1 ml de las suspensiones de la bacteria en cada tubo de ensayo. Dos de estos frascos tienen solo bacteria y dos de ellos tienen bacteria y bionanocompuesto (0,01 g). En un experimento típico para la construcción de las curvas de crecimiento, todos los cultivos bacterianos con una concentración aproximada de 106–107 unidades formadoras de colonias por mililitro (UFC/ml) se inocularon en un medio de caldo nutritivo. Para asegurar un contacto óptimo entre el bionanocompuesto de quitosano-AgIO3 y las células bacterianas, todos los experimentos se realizaron en una incubadora con agitación a 37 °C y 180 rpm. La tasa de muerte bacteriana se verificó en varios intervalos de tiempo en términos de espectros UV-visible. Se usaron como controles dos cultivos del medio libre de bionanocompuestos bajo las mismas condiciones de crecimiento de bacterias. Para evitar posibles interferencias ópticas durante las mediciones ópticas de los cultivos en crecimiento provocadas por las propiedades de dispersión de la luz de las nanopartículas, el mismo medio líquido sin microorganismos, pero que contiene la misma concentración de bionanocompuesto cultivado en las mismas condiciones que los controles en blanco.

Uno de los enfoques más críticos y prácticos en química orgánica es el diseño y síntesis de nanocompuestos con polímeros naturales derivados de recursos renovables y la investigación de su notable desempeño en campos médicos. Entre varias áreas en el diseño de descubrimiento de fármacos, la síntesis e introducción de nuevos agentes antibacterianos es extremadamente importante. En esta investigación, el bionanocompuesto de quitosano-AgIO3 se sintetizó a través de un método fácil con materiales de bajo costo y fácilmente disponibles. Brevemente, tras la adición de AgNO3, los grupos amino e hidroxilo en la estructura del quitosano coordinaron estrechamente los iones Ag+ para formar una suspensión de quitosano-Ag+. A continuación, con la adición de KIO3, los iones de Ag reaccionaron a KIO3 para generar nanopartículas de AgIO3. Finalmente, se aplicó un bionanocompuesto de quitosano-AgIO3 para obtener características antibacterianas contra varias bacterias. La corroboración estructural del bionanocompuesto se estudia utilizando técnicas analíticas que incluyen espectros FT-IR para detectar grupos funcionales relacionados, SEM para determinar la morfología y la estructura, análisis EDX para confirmación elemental y patrón XRD para estudiar la estructura cristalina del bionanocompuesto.

De acuerdo con la Fig. 2, la fabricación de quitosano-AgIO3 se determinó mediante la técnica de espectroscopia FT-IR. Como se puede ver en la Fig. 2a, las bandas de absorción características para el quitosano se mostraron en 3413 cm−1 como un pico fuerte para las vibraciones de estiramiento tanto para O–H como para N–H, superpuestas, 2918 cm−1 es para C–H vibraciones de estiramiento simétricas, 2873 cm−1 es para vibraciones de estiramiento asimétricas C–H. Las bandas confirmaron la presencia de grupos N-acetilo residuales en alrededor de 1654 cm-1 para el estiramiento C=O de la amida y 1593 cm-1 para las vibraciones de flexión N-H. El pico en 1518 cm-1 se ilustra con vibraciones de flexión C-H y 1375 cm-1 se representa con deformación simétrica CH3. La banda en 1315 cm−1 indica la vibración de estiramiento C–N de la amida, y 1259 cm−1 está relacionada con la vibración de flexión de los grupos hidroxilo presentes en el quitosano. El estiramiento asimétrico del puente C–O–C está determinado por un pico de absorción a 1153 cm−1. Las bandas de 1072 y 1029 cm−1 corresponden a las vibraciones de estiramiento C–O. En comparación con el espectro FT-IR del quitosano, el espectro FT-IR del bionanocompuesto muestra variación (Fig. 2b). La presencia de picos de absorción a 710 cm−1 y 748 cm−1 corresponden a nanopartículas de AgIO3 que representan la presencia de AgIO3 en el bionanocompuesto final. Sobre la base del hallazgo de datos de estos dos espectros, una razón para el cambio de los números de onda y las intensidades más bajas de los picos es la confirmación de las interacciones entre los átomos de Ag, O y N. Además, la banda de estiramiento de C=O en 1654 cm−1 y la banda de absorción de N–H en 1593 cm−1 cambiaron a una frecuencia más baja debido al enlace entre el quitosano y el AgIO3.

Espectros FT-IR de (a) quitosano y (b) bionanocompuesto de quitosano-AgIO3.

Se realizó un análisis EDX para estudiar la presencia de elementos en la estructura del bionanocompuesto (Fig. 3a). El espectro EDS representó además los elementos C, O, N, Ag e I en el bionanocompuesto preparado, y la relación atómica entre Ag e I fue de aproximadamente 1:1, lo que representa que el bionanocompuesto de quitosano-AgIO3 se sintetizó con éxito. Además, el mapeo elemental de los patrones EDX muestra la presencia de elementos C, O, N, Ag e I en el bionanocompuesto (Fig. 3b).

(a) Análisis EDX del bionanocompuesto de quitosano-AgIO3, y (b) Mapeo elemental del bionanocompuesto de quitosano-AgIO3.

Para estudiar la morfología y estructura del bionanocompuesto quitosano-AgIO3 se realizó el análisis SEM (Fig. 4). Como se ve en la figura, es claro que las nanopartículas de AgIO3 han cubierto la estructura del quitosano. Se observa bien la presencia y distribución uniforme de nanopartículas de AgIO3 en la superficie del quitosano. Según la imagen SEM, el tamaño medio de las nanopartículas de AgIO3 sintetizadas es inferior a 60 nm. Para especificar el tamaño de las nanopartículas, se seleccionaron al azar 70 partículas. El tamaño de partícula promedio de las nanopartículas es de aproximadamente 57 nm.

Imágenes SEM del bionanocompuesto de quitosano-AgIO3 y el diagrama de distribución del tamaño de partícula del bionanocompuesto de quitosano-AgIO3.

Para investigar la estructura de las nanopartículas inorgánicas para verificar la formación de nanopartículas de AgIO3 en el bionanocompuesto, se preparó el patrón XRD. Como se muestra en la Fig. 5, el bionanocompuesto exhibió los picos principales, consistentes con los picos característicos de AgIO3 (JCPDS 01-071-1928). Los picos de difracción de AgIO3 a valores 2θ de 11,75°, 19,37°, 28,21°, 29,73°, 30,41°, 30,95°, 34,23°, 38,94°, 43,90° y 51,69° se asignaron a (020), (021), (041), (211), (230), (002), (231), (001), (232) y (271) planos cristalinos del ortorrómbico AgIO3, respectivamente44. Además, el tamaño de las nanopartículas caracterizadas por el ensanchamiento de la línea de rayos X utilizando la ecuación de Scherrer (D = kλ/β cos θ) fue de aproximadamente 29 nm.

El patrón XRD del bionanocompuesto quitosano-AgIO3.

Se realizó la evaluación del desempeño antibacteriano del bionanocompuesto de quitosano-AgIO3 sintetizado contra Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus saprophyticus, Escherichia coli, Staphylococcus aureus mediante estudio in vitro y método de difusión en agar. Se midió la investigación de la zona de inhibición en milímetros (mm) alrededor del bionanocompuesto (0,01 g) para determinar su eficacia antibacteriana contra estos cinco tipos de microorganismos. La zona de inhibición del crecimiento del bionanocompuesto contra las cinco bacterias se muestra en la Fig. 6. Además, los detalles del ancho de la zona de inhibición de cada bacteria se enumeran en la Tabla 1. Estos resultados demuestran adecuadamente el alto rendimiento del quitosano-AgIO3 para matar varios bacterias Para evaluar y expandir el desempeño del bionanocompuesto contra estas cinco bacterias, se estudió la eficacia del bionanocompuesto en comparación con penicilina y sulfadiazina de plata como antibióticos comerciales con diferentes concentraciones de penicilina y sulfadiazina de plata y cantidad constante de bionanocompuesto (0.01 g ). Se resumió el halo de inhibición en milímetros (mm) alrededor del bionanocompuesto (0,01 g) y la penicilina (0,001 g/ml) (Fig. 7) y la sulfadiazina de plata (0,001 g/ml) (Fig. 8) (véanse las Tablas S1 y S2 en Información Complementaria). Se realizaron más mediciones del halo de inhibición alrededor del bionanocompuesto (0,01 g) y la penicilina (0,01 g/ml) y la sulfadiazina de plata (0,01 g/ml) (véanse las Figs. S1 y S2 y las Tablas S3 y S4 en Información complementaria) para determinar la influencia de concentración en la actividad antibacteriana. Estos hallazgos representan que el quitosano-AgIO3 tiene un alto potencial para la erradicación de varios microorganismos. Además, la actividad antibacteriana del bionanocompuesto quitosano-AgIO3 se comparó con los materiales antibacterianos relevantes informados en la literatura. Los datos sobre el ZOI (mm) hacia la bacteria objetivo se resumen en la Tabla 2.

Zonas de inhibición de quitosano-AgIO3 contra (a) Pseudomonas aeruginosa; (b) Klebsiella pneumoniae; (c) Staphylococcus saprophyticus; (d) Escherichia coli; (e) Bacteria Staphylococcus aureus durante 24 h.

Las imágenes de la placa de colonias de bacterias Staphylococcus aureus (ATCC 12600) y Escherichia coli (ATCC 9637) en presencia de bionanocompuesto de quitosano-AgIO3 (0,01 g) se representan en la Fig. 9. Como se ilustra en la figura, todas las colonias de Staphylococcus aureus y Escherichia coli se eliminó mediante el tratamiento con el bionanocompuesto quitosano-AgIO3.

Imágenes de (a) Staphylococcus aureus y (b) Escherichia coli en ausencia y presencia de bionanocompuesto después de 24 h.

Las mediciones de OD de cultivos bacterianos se investigaron en presencia de 0,01 g de bionanocompuesto de quitosano-AgIO3, 0,5 estándar de turbidez de McFarland y medio de caldo nutritivo. Los cultivos en crecimiento se controlaron en varios momentos, incluidos 3, 6 y 18 h (Fig. 10). Como puede verse en un diagrama de barras en la Fig. 10a, la propiedad antibacteriana del bionanocompuesto demuestra una inhibición considerable del crecimiento bacteriano para Escherichia coli y Staphylococcus aureus. Como se representa en un gráfico en la Fig. 10b, para Escherichia coli después de 3 h, el 71,96 % del contenido de bacterias disminuyó con la presencia del bionanocompuesto, y esta inhibición del crecimiento fue del 84,37 % después de 6 h. Después de 18 h, la reducción del contenido de bacterias es del 85,1 %. Para Staphylococcus aureus después de 3 h, el 64,7 % del contenido de bacterias disminuyó en presencia de bionanocompuesto. Después de 6 h, esta reducción en el contenido de bacterias fue de alrededor del 71,22 %, y al menos después de 18 h, se redujo el 75,69 % del contenido de bacterias. Según los hallazgos actuales de esta investigación, el bionanocompuesto de quitosano-AgIO3 se presenta como un agente antibacteriano para matar e inhibir el crecimiento bacteriano en términos de espectros de absorción UV.

(a) El efecto del bionanocompuesto quitosano-AgIO3 sobre la inhibición del crecimiento bacteriano para Escherichia coli y Staphylococcus aureus y (b) el porcentaje de reducción en el contenido de bacterias después de 3, 6 y 18 h por mediciones de OD.

El mecanismo de la eficacia antimicrobiana del bionanocompuesto de quitosano-AgIO3 se estudió más a fondo en Escherichia coli mediante citometría de flujo. Se cree que ROS es un factor fundamental en las actividades antibacterianas de los nanomateriales, que podrían dañar directamente la membrana celular, los fosfolípidos y/o las proteínas de membrana. Las especies reactivas de oxígeno como los radicales libres causan daño a una variedad de patógenos51,52. Los nanomateriales con capacidad para producir ROS podrían ser una estrategia beneficiosa para luchar contra las bacterias. Para explorar el mecanismo antibacteriano del bionanocompuesto, se midió la producción de ROS mediante DCFDA, una sonda fluorescente comercial. Como se puede ver en la Fig. 11, la intensidad de fluorescencia en el diagrama del bionanocompuesto aumentó, y cuanto más intensa era la intensidad de fluorescencia, mayor era el número de células muertas, lo que significa una buena actividad antibacteriana del bionanocompuesto. La intensidad de fluorescencia del bionanocompuesto fue más fuerte que la del grupo de control y el parámetro MFI del bionanocompuesto es tres veces mayor que el del grupo de control, lo que significa que las células muertas en el bionanocompuesto aumentan mucho. Como consecuencia, la bacteria resultó dañada debido al daño de la membrana causado por la producción de ROS, logrando así actividad antibacteriana (Fig. 12).

El análisis de citometría de flujo de (a) bionanocompuesto y, (b) grupo de control con Escherichia coli.

Posible mecanismo antibacteriano del bionanocompuesto quitosano-AgIO3.

Debido al aumento de la resistencia microbiana a los agentes antimicrobianos existentes, que desafortunadamente aumenta el porcentaje de enfermedad y mortalidad, la introducción y síntesis de nuevos agentes antimicrobianos son esenciales. Para introducir nuevos agentes antimicrobianos en este estudio, el nanocompuesto de quitosano-AgIO3 se diseñó y sintetizó con éxito por primera vez con un método simple y utilizando materiales fácilmente disponibles. El quitosano es un polímero natural y se utilizó como base del bionanocompuesto y las nanopartículas de AgIO3 se inmovilizaron en la estructura del quitosano. La presencia de quitosano en el bionanocompuesto da lugar a un nanocompuesto biodegradable y respetuoso con el medio ambiente. Las características estructurales del bionanocompuesto se estudiaron con varias técnicas, incluidos los análisis FT-IR, EDX, SEM y XRD, y los resultados verificaron la inmovilización efectiva de AgIO3 en quitosano. La eficacia antibacteriana se evaluó mediante la estrategia de difusión en agar, método de conteo en placa y estudio de densidad óptica con diferentes microorganismos. Además, se comparó la eficacia antibacteriana del bionanocompuesto con dos medicamentos comerciales y, en algunos casos, el bionanocompuesto sintetizado tiene un mejor desempeño contra las bacterias en comparación con los medicamentos comunes. Ante la difícil erradicación de Pseudomonas aeruginosa debido a su gran capacidad de resistencia a los antibióticos, es muy importante presentar un nuevo agente antibacteriano que tenga un buen funcionamiento contra esta bacteria. Además, el bionanocompuesto de quitosano-AgIO3 como agente antibacteriano eficiente y respetuoso con el medio ambiente es muy recomendable en un proceso de purificación de agua y aplicaciones biomédicas debido a sus propiedades específicas, como alta actividad antibacteriana, método de síntesis ecológico, simple y de bajo costo. Los hallazgos representan que este trabajo podría abrir un camino para producir un nuevo bionanocompuesto biodegradable de bajo costo con alto rendimiento contra diferentes bacterias. Debido a la eficacia del bionanocompuesto sintetizado en comparación con los antibióticos, podría introducirse como una buena sugerencia en aplicaciones terapéuticas, así como en heridas por quemaduras. El principal impedimento de este trabajo es la separación del bionanocompuesto que está diseñado en nuestra futura investigación, así como otras aplicaciones del bionanocompuesto quitosano-AgIO3.

Información complementaria adicional incluye la tabla del ancho del halo de inhibición en milímetros (mm) alrededor del bionanocompuesto (0,01 g) frente a diversas bacterias y lo comparó con penicilina 0,001 g/ml y sulfadiazina de plata, además de estas tablas para penicilina 0,01 g/ml y sulfadiazina de plata. Además, las cifras relacionadas con los halos de inhibición del quitosano-AgIO3 contra varias bacterias durante 24 h en comparación con 0,01 g/ml de penicilina y sulfadiazina de plata se pueden encontrar en la versión en línea de este artículo en el sitio web del editor.

Gong, P. et al. Preparación y actividad antibacteriana de nanopartículas de Fe3O4@Ag. Nanotecnología 18, 285604 (2007).

Artículo ADS CAS Google Académico

Mohan, AN, B, M. y Panicker, S. Síntesis fácil de nanocompuestos de óxido de grafeno y estaño derivados de desechos agrícolas para mejorar la actividad antibacteriana contra Pseudomonas aeruginosa. ciencia Rep. 9, (2019).

Hwang, IY et al. El probiótico Escherichia coli diseñado puede eliminar y prevenir la infección intestinal por Pseudomonas aeruginosa en modelos animales. Nat. común 8, 15028 (2017).

Artículo ADS CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Li, B., Zhao, Y., Liu, C., Chen, Z. y Zhou, D. Patogénesis molecular de Klebsiella pneumoniae. Futuro Microbiol. 9, 1071–1081 (2014).

Artículo PubMed CAS Google Académico

Paczosa, MK & Mecsas, J. Klebsiella pneumoniae: Ir al ataque con una fuerte defensa. Microbiol. mol. Biol. Rev. 80, 629–661 (2016).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Raz, R., Colodner, R. & Kunin, CM ¿Quién eres tú-Staphylococcus saprophyticus?. Arco. clin. Infectar. Dis. 40, 896–898 (2005).

Artículo Google Académico

Haliru, K. y Abubakar, A. Actividad antibacteriana del compuesto fotocatalizador ZnFe2O4/TiO2 en Escherichia coli (E. coli) y Staphylococcus aureus (S. aureus). química Res. J. 6, (1), 89–93 (2021).

McMahon, S. et al. Polímero hiperramificado a base de poli(etilenglicol) de RAFT y su aplicación como hidrogel antibacteriano cargado con sulfadiazina de plata en el cuidado de heridas. Aplicación ACS. Mate. Interfaces. 8, 26648–26656 (2016).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Ullah, S. et al. Propiedades antibacterianas de la impregnación in situ y funcionalizada en superficie de sulfadiazina de plata en nanofibras de poliacrilonitrilo. En t. J. Nanomed. 14, 2693–2703 (2019).

Artículo CAS Google Académico

Chang, C., Mahmood, MM, Teuber, SS y Gershwin, ME Descripción general de la alergia a la penicilina. Clínica Rev. Allerg. inmunol. 43, 84–97 (2011).

Artículo CAS Google Académico

Navya, PN & Daima, HK Ingeniería racional de propiedades fisicoquímicas de nanomateriales para aplicaciones biomédicas con perspectivas nanotoxicológicas. Nano convergencia. 3, 1 (2016).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Karimi-Maleh, H. et al. Monitoreo de herbicidas de cianazina como sustancia peligrosa mediante un biosensor de nanoestructura de ADN. J. Peligro. Mate. 423, 127058 (2022).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Karaman, C. Puntos de carbono co-dopados con nitrógeno y azufre derivados de la piel de naranja: un nano refuerzo para mejorar el rendimiento electrocatalítico ORR de las redes de grafeno 3D. Electroanálisis 33, 1356–1369 (2021).

Artículo CAS Google Académico

Karimi-Maleh, H. et. Alabama. Enfoque nanoquímico para la fabricación de marcos de carbón activado derivados de biomasa codecorados con Fe y N: un electrocatalizador de reacción de reducción de oxígeno prometedor en medios neutros. J. Nanoestructura. química (2022).

Karimi-Maleh, H. et al. Determinación de colorantes D&C Red 33 y Patent Blue V Azo usando un impresionante sensor electroquímico basado en electrodo de pasta de carbón modificado con ZIF-8/g-C3N4/Co y líquido iónico en enjuague bucal y pasta dental como muestras reales. Química alimentaria Toxicol. 162, 112907 (2022).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Karimi-Maleh, H. et al. Un biosensor de ADN verde y sensible basado en guanina para el monitoreo anticancerígeno de idarubicina en muestras biológicas: una estrategia simple y rápida para el control de la calidad de la salud en el procedimiento de quimioterapia confirmado por investigación de acoplamiento. Chemosphere 291, 132928 (2022).

Artículo ADS CAS PubMed Google Scholar

Barani, H., Montazer, M., Samadi, N. & Toliyat, T. Síntesis in situ de nano plata/lecitina en lana: mejora de la difusión de nanopartículas. Coloides Surf., B 92, 9–15 (2012).

Artículo CAS Google Académico

Sohrabnezhad, S, Rassa, M. & Mohammadi Dahanesari, E. Estudio espectroscópico de haluros de plata en montmorillonita y su actividad antibacteriana. J. Photochem. Fotobiol. B: Biol. 163, 150–155 (2016).

Kamalzare, M., Bayat, M. y Maleki, A. Síntesis verde y eficiente de tres componentes de 4H-pirano catalizada por CuFe2O4@starch como bionanocatalizador reciclable magnéticamente. R. Soc. ciencia abierta 7, 200385 (2020).

Artículo ADS CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Soltaninejad, V. & Maleki, A. Una película de bionanocompuestos verde y ecológica (poli(alcohol vinílico)/TiO2/quitosano/clorofila) por capacidad fotocatalítica y actividad antibacteriana bajo irradiación con luz visible. J. Photochem. Fotobiol. 404, 112906 (2021).

Artículo CAS Google Académico

Kamalzare, M., Ahghari, MR, Bayat, M. & Maleki, A. Fe3O4@quitosan-bionanocomposite de ácido tánico como nanocatalizador novedoso para la síntesis de piranopirazoles. ciencia Rep. 11, 1 (2021).

Artículo CAS Google Académico

Bharathi, D., Ranjithkumar, R., Chandarshekar, B. & Bhuvaneshwari, V. Preparación de nanocompuestos de óxido de zinc recubiertos con quitosano para mejorar la actividad antibacteriana y fotocatalítica: como un bionanocompuesto. En t. J. Biol. macromol. 129, 989–996 (2019).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Dinari, M., Shirani, MA, Maleki, MH y Tabatabaeian, R. Bionanocompuesto reticulado verde de polímero de goma guar/hidróxido doble de capas magnéticas como adsorbente eficiente de Cr (VI) de una solución acuosa. Carbohidr. polim. 236, 116070 (2020).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Yadollahi, M., Farhoudian, S. & Namazi, H. Síntesis en un solo recipiente de microesferas de hidrogel de bionanocompuestos antibacterianos de quitosano/plata como sistemas de administración de fármacos. En t. J. Biol. macromol. 79, 37–43 (2015).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Nath, D. & Banerjee, P. Nanotecnología verde: una nueva esperanza para la biología médica. Reinar. Toxicol. Farmacol. 36, 997–1014 (2013).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Gandhi, H. & Khan, S. Síntesis biológica de nanopartículas de plata y su actividad antibacteriana. J. Nanomed. Nanotecnología. 07, (2016).

Yang, KK., Wang, XL y Wang, Y-Zh. Avances en nanocompuestos de polímeros biodegradables. J. Ind. Ing. química 13, 485–500, (2007).

Maleki, A. & Kamalzare, M. Nanocatalizador compuesto de Fe3O4@celulosa: Preparación, caracterización y aplicación en la síntesis de benzodiazepinas. Catal. común 53, 67–71 (2014).

Artículo CAS Google Académico

Azmana, M. et al. Una revisión sobre el quitosano y los bionanocompuestos a base de quitosano: material prometedor para combatir problemas globales y sus aplicaciones. En t. J. Biol. macromol. 185, 832–848 (2021).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Maleki, A. & Kamalzare, M. Una síntesis eficiente de derivados de benzodiazepina a través de una reacción de tres componentes en un solo recipiente acelerada por un nanocompuesto de óxido de hierro superparamagnético soportado por quitosano. tetraedro Lett. 55, 6931–6934 (2014).

Artículo CAS Google Académico

Singh, P. & Mijakovic, I. El efecto antibacteriano de las nanopartículas de plata es más fuerte si el huésped de producción y el patógeno objetivo están estrechamente relacionados. Biomedicinas. 10, 628 (2022).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Chang, H.-Y. et al. Síntesis y actividad antimicrobiana de nanoestructuras de oro/plata-telurio. Aplicación ACS. Mate. Interfaces. 6, 8305–8312 (2014).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Tang, J. et al. Nanocompuesto de óxido de plata y grafeno como agente antibacteriano altamente efectivo con mecanismos específicos de especie. Aplicación ACS. Mate. Interfaces. 5, 3867–3874 (2013).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Esmaeillou, M., Zarrini, G., Ahangarzadeh Rezaee, M., Shahbazi mojarrad, J. y Bahadori, A. Vancomicina recubierta con nanopartículas de plata como agente antibacteriano contra las bacterias multirresistentes. Adv. Farmacia Toro. 7, 479–483 (2017).

Tamboli, MS et al. Nanocables de nanocompuestos de plata-polianilina sintetizados mediante polimerización in situ y su novedosa funcionalidad como agente antibacteriano. Surf de coloides. B Biointerfaces. 92, 35–41 (2012).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Maleki, A., Movahed, H. & Paydar, R. Diseño y desarrollo de un nuevo nanocompuesto de celulosa/γ-Fe2O3/Ag: un posible catalizador verde y agente antibacteriano. RSC Avanzado. 6, 13657–13665 (2016).

Artículo ADS CAS Google Académico

Zhang, M. et al. Efecto de diferentes reductores en la composición y desempeño fotocatalítico de híbridos Ag/AgIO3 preparados por el método de reducción in situ. Inorg. química común 115, 107876 (2020).

Artículo CAS Google Académico

Song, S., Hong, F., He, Z., Cai, Q. & Chen, J. Compuestos de AgI/TiO2 modificados con AgIO3 para la degradación fotocatalítica de p-clorofenol bajo irradiación de luz visible. J. Interfaz coloidal Sci. 378, 159–166 (2012).

Artículo ADS CAS PubMed Google Scholar

Cao, QW, Zheng, YF y Song, XC Degradación fotocatalítica de RhB impulsada por luz visible mejorada por compuestos AgIO3/WO3. J. Instituto de Taiwán química Ing. 70, 359–365 (2017).

Artículo CAS Google Académico

Zhang, LY y Hou, XL Análisis de especiación del 129I y sus aplicaciones en la investigación medioambiental. Radioquim. Acta. 101, 525–540 (2013).

Artículo CAS Google Académico

Ahghari, MR, Soltaninejad, V. & Maleki, A. Síntesis de nanopartículas de níquel mediante un método verde y conveniente como espejo magnético con actividades antibacterianas. ciencia Rep. 10, 12627 (2020).

Artículo ADS CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Hajizadeh, Z., Hassanzadeh-Afruzi, F., Jelodar, DF, Ahghari, MR & Maleki, A. Cu(ii) inmovilizado en nanocompuesto Fe3O4@HNTs-tetrazol (CFHT): síntesis, caracterización, investigación de su papel catalítico para la reacción de cicloadición dipolar 1,3 y la actividad antibacteriana. RSC Avanzado. 10, 26467–26478 (2020).

Artículo ADS CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Soltaninejad, V., Ahghari, MR, Taheri-Ledari, R. & Maleki, A. Película nanocompuesta bifuncional de PVA/ZnO/AgI/clorofila: actividad fotocatalítica mejorada para la degradación de contaminantes y propiedades antimicrobianas bajo irradiación de luz visible. Langmuir 37, 4700–4713 (2021).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Xie, J. et al. Fabricación in situ de estado sólido de AgCl/AgI/AgIO3 híbrido con rendimiento fotocatalítico de UV a visible mejorado. ciencia Rep. 7, 1 (2017).

CAS Google Académico

Yildiz, A. et al. Síntesis y caracterización de nanocompuestos Fe3O4@Cs@Ag y su uso en la producción de membranas nanofibrosas magnéticas y antibacterianas. aplicación Navegar. ciencia 521, 146332 (2020).

Artículo CAS Google Académico

Raza, M. et al. Estudios antibacterianos dependientes del tamaño y la forma de nanopartículas de plata sintetizadas por rutas químicas húmedas. Nanomateriales 6, 74 (2016).

Artículo ADS PubMed Central CAS Google Scholar

Rahimi , J. , Taheri-Ledari , R. , Nixefat , M. & Maleki , A. Reducción mejorada de derivados de nitrobenceno: estrategia efectiva ejecutada por Fe3O4/PVA-10%Ag como nanocatalizador híbrido versátil. Catalogar. común Rev. 134, 105850 (2020).

Artículo CAS Google Académico

Maleki, A., Taheri-Ledari, R., Rahimi, J., Soroushnejad, M. & Hajizadeh, Z. Fácil formación de enlaces peptídicos: interacción efectiva entre los anillos de isotiazolona y los grupos silanol en superficies de nanocompuestos de óxido de plata/hierro. ACS Omega 4, 10629–10639 (2019).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Motshekga, SC, Ray, SS, Onyango, MS & Momba, MNB Síntesis asistida por microondas, caracterización y actividad antibacteriana de arcilla de bentonita soportada por nanopartículas de Ag/ZnO. J. Peligro. Mate. 262, 439–446 (2013).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Kim, JD, Yun, H., Kim, GC, Lee, CW y Choi, HC Actividad antibacteriana y reutilización de nanocompuestos CNT-Ag y GO-Ag. aplicación Navegar. ciencia 283, 227–233 (2013).

Artículo ADS CAS Google Académico

Tan, L. et al. Desinfección in situ a través del almacenamiento de especies de oxígeno radical fotoinspirado y liberación térmica de fósforo negro con estabilidad química reforzada. Pequeño 14, 1703197–1703207 (2017).

Artículo CAS Google Académico

Zhang, D. et al. Nanocompuestos de fósforo negro cargados con nanocobre para una aplicación antibacteriana sinérgica eficiente. J. Peligro. Mate. 393, 122317–122325 (2020).

Artículo CAS PubMed Google Académico

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Los autores agradecen el apoyo parcial del Consejo de Investigación de la Universidad de Ciencia y Tecnología de Irán.

Laboratorio de Investigación de Catalizadores y Síntesis Orgánica, Departamento de Química, Universidad de Ciencia y Tecnología de Irán, Teherán, 16846-13114, Irán

Mohammad Ali Ahghari, Mohammad Reza Ahghari, Maryam Kamalzare y Ali Maleki

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AM diseñó el estudio, coordinó el estudio y ayudó en la redacción del manuscrito y la interpretación de los datos, MRA participó en el diseño del estudio, llevó a cabo análisis y participó en la discusión de los resultados. MAA MK y preparó el borrador del manuscrito y participó en la discusión de los resultados. Todos los autores leyeron y aprobaron el manuscrito final.

Correspondencia a Ali Maleki.

Los autores declaran no tener conflictos de intereses.

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Ahghari, MA, Ahghari, MR, Kamalzare, M. et al. Diseño, síntesis y caracterización de un nuevo bionanocompuesto ecológico de quitosano-AgIO3 y estudio de su actividad antibacteriana. Informe científico 12, 10491 (2022). https://doi.org/10.1038/s41598-022-14501-6

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Recibido: 05 Marzo 2022

Aceptado: 08 junio 2022

Publicado: 21 junio 2022

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-022-14501-6

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